Fractionnement du plasma sanguin

Procédé de fractionnement, également appelé fractionnement du plasma froid ou fractionnement de l’éthanol

Après que le sang a été séparé en ses principaux composants (généralement par centrifugation), les composants qui en résultent sont le plasma sanguin, les plaquettes et les globules blancs et rouges. Le plasma contient encore de précieuses substances dissoutes qui sont séparées par des conditions variables. L’un des procédés les plus efficaces a été mis au point par le Dr Edwin Cohn, qui consiste à refroidir et à modifier l’acidité du plasma.

Normalement, le processus commence avec du plasma pur à 3-5 ºC et un pH d’environ 7. On ajoute lentement de l’éthanol et de l’acide octanoïque, ce qui réduit le pH du liquide jusqu’à ce que les premières protéines soient précipitées, formant ainsi de gros amas. Ces protéines insolubles peuvent être collectées par centrifugation ou filtration. Les protéines collectées et filtrées peuvent ensuite être traitées avec plus d’éthanol et d’acide octanoïque pour précipiter le type de protéines suivant. Les étapes ci-dessus sont répétées jusqu’à ce qu’un total d’environ 40 % d’éthanol soit ajouté et qu’un pH de 4,8 soit atteint, où l’albumine est récupérée.

Aspects du fractionnement

L’un des principaux aspects du processus de fractionnement est la pureté et le rendement de chaque fraction. Si la précipitation à une étape n’est pas complète, le rendement est réduit. Si l’on ajoute trop d’acide, la pureté de chaque étape du fractionnement est réduite. Si l’acide est ajouté trop rapidement, il y a un surdosage local, ce qui réduit le pH à des niveaux plus bas et donc le fractionnement d’un plus grand nombre de protéines. Ces protéines ne se redissoudront pas une fois le lot homogénéisé et le pH stable.

Blood samples
Blood DNA

Mélange d’additifs de fractionnement

Souvent, certains additifs tels que l’acide oxalique doivent être introduits dans les liquides de fractionnement. Dans ce cas, un mélange doux est de première importance.
Souvent, les agitateurs rotatifs ne sont pas adaptés ou doivent être réduits à des vitesses de rotation très faibles pour éviter toute altération du produit. À de telles vitesses, l’agitateur ne peut pas fonctionner correctement.

Il est évident que plus le mélange est rapide, plus le lot peut être homogénéisé rapidement tout en ajoutant constamment de l’éthanol et de l’acide octanoïque. En même temps, il faut choisir un système de mélange doux pour éviter d’endommager les précipités. Le FUNDAMIX® est devenu l’équipement de pointe pour ces étapes de fractionnement. Il intègre trois avantages principaux dans un seul équipement :

  1. La plaque de mélange vibrante exerce sur le fluide des forces de cisaillement beaucoup plus faibles que n’importe quel agitateur rotatif sur le marché.
  2. Le volume de déplacement du liquide est exceptionnellement élevé, ce qui assure une homogénéisation extrêmement rapide.
  3. La direction verticale du mélange crée un flux ascendant élevé au centre et un flux descendant sur les parois, ce qui empêche les concentrations locales de pH à la surface du liquide où les agents de précipitation sont ajoutés.

Production d’albumine

L’albumine est une famille de protéines globulaires, qui sont solubles dans l’eau et subissent une dénaturation par la chaleur. L’albumine sérique est la plus courante de cette famille et la principale protéine du plasma sanguin humain. Elle lie l’eau et de nombreuses autres substances et régule la pression osmotique du sang. L’albumine est utilisée pour la préparation de vaccins, le traitement des grands brûlés et d’autres applications médicales.

Le FUNDAMIX® est très bien adapté au mélange de liquides de fractionnement et à la préparation de suspensions pour la filtration stérile dans la production d’albumine. Des réservoirs d’une capacité maximale de 9 300 litres sont utilisés à cet effet. Pour des quantités aussi importantes, le plus grand (supérieur au type 4) de la famille FUNDAMIX® est utilisé.

Blood Plasma
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